Popisuje se nenákladný způsob měření kinetických změn zákalu při kultivaci mikroorganismů v kapalných půdách. Při provedení jednorázové kultivace mikroorganismů v kapalné půdě dojde k rozptylu světla na množících se mikroorganismech. Zákalometrem (fotometrem) se změří tento rozptyl jako funkce času a získají se fotometrické růstové křivky množících se mikroorganismů.
Při kultivaci mikroorganismů dochází ke změnám růstové rychlosti. V jisté fázi lze růstovou rychlost popsat rovnicí X(t) = X (0)*emt , kde m je specifická růstová rychlost kultivovaného mikroorganismu, t je čas a X je veličina související s počtem jedinců v jednotce objemu. Při předpokladu, že množení mikroorganismů probíhá dělením jednoho mikroorganismu na dva lze definovat další parametr růstu mikroorganismů tzv. čas zdvojení ( generační čas) pomocí vztahu t2 = ln2/m.
- zkalibrovaný školní zákalometr
- držák zkumavek do měřící komory zákalometru
- zkumavka o Ć 17 mm, Ć 19 mm resp. Ć 20 mm resp. kyvety nebo lahve
- míchadlo do zkumavky
- laboratorní pomůcky pro přípravu vzorků
- teploměr resp. termostat
- filtrační papír, filtrační nálevka, kádinka
Vzorky pro nefelometrické sledování kultivací se připravují známými mikrobiologickými postupy popsanými zevrubně v dostupné literatuře [14]. Testované mikroorganismy jsou namnožovány na pevných agarových půdách zaočkovaných roztěrem. Po jejich dostatečném nárůstu jsou očkovací kličkou buňky resuspendovány ve velmi malém objemu sterilního fyziologického roztoku. Z této husté suspenze se následným ředěním připraví řidčí suspenze pomocí níž se naočkuje zvolená koncentrace buněk v tekuté půdě ve zkumavce, ve které se bude vzorek kultivovat a dále měřit.
Po dobu kultivace se umístí připravené vzorky ve zkumavkách na stojanech
ve standardním laboratorním termostatu. Ve zvolených časových intervalech
se vzorky postupně vkládají do měřící komory zákalometru a během několika
vteřin se odečítají naměřené hodnoty zákalu a zapisují se do tabulky pro další zpracování.
Ukázka naměřeného příkladu